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등록/수정일21.03.05 / 21.03.05
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Gel-elution
Introduction(실험소개)
전기영동이 끝난 후 밴드를 이용해 젤에서 DNA를 추출해내는 실험이다.
material method
실험재료에는 에펜도르프 튜브, 칼, 전기영동이 끝난 젤, 스핀칼럼, 100% isopropanol, FB버퍼, 워싱 버퍼, BST 버퍼, 뉴클리에이즈 프리 워터가 필요하다,
disscusion
key words : FB버퍼, chaotropic salt, 50도
실험에서 여러 종류의 버퍼들이 사용되었다. FB 버퍼는 젤을 녹여내는 버퍼로 사용되었으며 실리카 멤브레인과 물을 달라붙지 못하게 하고 DNA를 달라붙게 하는 물질인 chaotropic salt가 들어있고, 샘플을 일루션 하는데에는 EA 버퍼가 아닌 뉴클레이즈 프리 워터를 이용했다. 이는 EA는 2가 양이온 킬레이터인 EDTA가 들어있어 향후 실험에 영향을 미칠 수 있기 때문이다.
Contents
1. Gel-extraction
2. TA-cloning / Ligation
3. Transformation / Competent cell
4. Blue-White selection
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