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등록/수정일15.04.23 / 15.04.23
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<미생물공학 실험>
Bacillus coagulans를 찾아내기
(Identification of bacteria by 16S ribosomal RNA gene(rDNA) sequence determination)
<서 론>
1.Bacillus coagulans의 특징 및 설명
2.실험전략
2014.5.26.(월)
집적배양 과정
-총 4가지 시료 중 {순창 메주,생기몰 메주,재래식 메주(초기,후기),쌀겨} 재래식 메주를 선택하여서 초기,후기 재래식 메주를 각각 10g을 채취후 MRS broth와 항진균제인(Cyclohexmide,NaN3)을 넣어서 농도를 10ppm으로 맞춰주고 autoclave에 50도로 배양한다.
-집적배양 과정시 주의사함
autoclave에 넣은뒤 shaking과정을 하지 않는다. shaking 과정시 균이 유리에 닿아 죽을 수 있기 때문에 방지하고자 하지 않는다. 50도로 유지시켜준다.
2014.5.29.(목)
spreading 과정
-autoclave에 배양했던 것을 꺼내어서 10-1부터 10-9까지 희석시킨뒤 희석시킨 것을 100ul씩 따서 MRS Agar배지에 speaing을 한다.(배지의 농도는 10-2부터 10-10이 된다)
speading한 배지를 초기와 후기로 나누어 각각 랩으로 씌워준뒤 다시 autoclave에 넣어준다
-speading 과정시 주의 사항
제대로 희석이 안되 었을시 균이 제대로 안자랄수 있으므로 희석시 주의해서 해야된다.
MRS Agar배지에 Spreading과정시 균의 오염이 발생할수 있으므로 반드시 Clean bench 안에서 해야한다.
수분의 증발로 인한 배지에 손실을 막기 위해서 랩을 반드시 씌워준다.
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