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등록/수정일13.12.31 / 13.12.31
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1. 실험목적 및 개요
1) 크로마토그래피의 정의, 종류, 원리에 대해 알아보자.
2) 얇은 막 크로마토그래피를 이용하여 식물의 엽록체색소를 분리해 보자.
2. 실험원리
1) 크로마토그래피(Chromatography)란?
- 어원 : ‘색’을 뜻하는 ‘chroma’ + ‘쓰다’를 뜻하는 ‘graphein’의 합성어이다.
- 정의 : 혼합물에 들어 있는 매우 적은 양의 물질을 분리하고 확인하는 방법
- 종류
1. 흡착 크로마토그래피
2. 분배 크로마토그래피
3. 이온교환 크로마토그래피
4. 친화 크로마토그래피
- 원리 : 두 개의 서로 섞이지 않는 상(相)사이에 서로 다르게 분배되는 현상을 이용 하여 분리
-> 두 개의 서로 섞이지 않는 상 : 이동상(移動相), 고정상(固定相)
1. 이동상 : 액체나 기체 (용매)
2. 고정상 : 고체나 액체 (TLC 자체)
- 값 : 용매가 이동한 거리에 대한 용질의 이동거리
2) 얇은 막 크로마토그래피(Thin-Layer Chromatography)
- 소량의 물질의 존재를 알 수 있는 간단하고 효과적 방법
- 실리카겔과 알루미나의 고체가 고정상으로 작용
- 혼합물을 TLC에 점적하면 전개 용액이 모세관 현상에 의해 고정상을 타고 올라와 혼합물 분리
- 분리원리 : 용질마다 한 용매의 용해도가 다르기 때문에 용해도가 높으면 Rf값이 크 고 낮으면 Rf값이 크고 낮으면 Rf값이 작다.
=> 위의 원리와 모세관 현상에 의해 용질의 종류와 색을 구분할 수 있다.
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