보고서 설명

1. 도구 및 방법

가) 실험 도구
시금치 8g, 칼, 막자사발, 주봉, 250mL, 100 mL 비이커, 미리 냉장된 거즈, 50 mL 원심관, 유리막대. centrifuge, Ice box, 얼음, 75-100 W 형광등 또는 백열등, 시험관, 알루미늄 호일, 광도 측정기, 현미경, Slide & cover glass. 100 mL ice-cold 0.1 M phosphate buffer (pH 6.5), 0.5 mM dichlorophenol indophenol (DCPIP)

본문일부 및 목차

나) 실험 방법

실험 1 엽록체의 분리 : 시간이 없을 경우 엽록체 현탁액은 조교가 미리 준비한다.
다음의 모든 실험은 저온에서 수행한다.
① 깨끗한 시금치 4g을 저울에 잰다.
② 가위로 작은 조각으로 자르고 15 mL의 찬 phosphate 버퍼에 담근다. 깨끗한 sea sand를 소량 첨가한 후에 약 2분간 냉동된 막자사발에서 조직을 골고루 간다.
③ 냉장된 거즈를 8겹으로 만들어 시금치 파쇄액을 거른다. 이때 여과액은 바로 냉장보관 원심관에 넣는다.
④ 400g에서 여과액을 1분간 원심분리한다. 원심관은 반드시 대각선 방향으로 무게 균형을 맞춘 후 원심분리한다.
⑤ 원심분리 후 상징액을 다른 깨끗한 차가운 원심관으로 옮긴 후 4℃, 1000g에서 다시 5분간 원심분리한다.
⑥ 원심분리 후 상징액을 버리고 밑부분에 가라앉은 펠렛을 10 mL의 찬 phosphate 버퍼에 현탁시킨다.
⑦ 3 mL의 엽록체 현탁액을 깨끗한 차가운 시험관에 옮긴 후 6 mL의 찬 phosphate 버퍼를 첨가한 후 골고루 섞는다. 이것이 광합성의 Hill 반응에 사용할 엽록체 현탁액이다 ⇒ 냉장 보관/장기간 보관시 -20℃보관

실험 2. 엽록체의 관찰
현미경을 이용, 분리한 엽록체의 구조를 관찰한다.
슬라이드글라스에 한 방울의 엽록체 현탄액을 떨어뜨리고 기포가 들어가지 않게 주의하여 커버글라스를 덮은 뒤 100X ~ 400X로 관찰한다.

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#엽록체

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