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등록/수정일12.05.08 / 12.05.08
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1. 실험목적
DNA의 정량방법에 대하여 습득하고, 온도에 따른 변화를 확인함으로써 DNA의 생화학적 특성을 이해한다.
2. 실험원리
1) Nucleotide 의 구성 물질 및 각각의 구성 물질에 대해 설명하시오.
리보오스의 1-탄소에는 염기와 N-클리코시드 결합을 이루어 누클레오시드(Nucleotide)를 형성한다. 누클레오시드에 인산(Phospate)이 결합하면 바로 누클레오티드(Nucleotide)가 되는 것이다. 인산은 누클레오티드에서 추가적으로 결합할 수 있는데, 한 개의 인산이 결합한 것을 누클레오티드 1인산(XMP), 두 개의 인산이 결합한 것을 누클레오티드 2인산(XDP), 3개의 인산이 결합한 것을 누클레오티드 3인산(XTP)이라 한다.
· 리보오스(Ribose) : 누클레오티드(Nucleotide)의 기본 골격에 해당하는 것으로 5탄당(Pentose)으로 되어있으며, 2‘-탄소에 수소(-H)가 있으면 리보오스(Ribose), 히드록실기(-OH)가 있으면 디옥시리보오스(deoxyribose)라고 한다.
· 염기(Base) : 유전암호(genetic code)를 구성하는 것으로 퓨린계(A, G)와 피리미딘계(T(U), C)로 나누어진다. 누클레오티드에서 당과 N-글리코시드 결합을 한다.
· 인산(Phosphate) : 인산에스테르결합에 의해 당의 5‘-탄소에 결합해 있으며 이것의 존재로 인해 누클레오티드 또는 핵산은 강한 음전하를 띠게 된다.
2) 샤가프의 법칙이란?
샤가프는 여러 종류의 생물에서 분리한 DNA 분자의 아데닌(A), 티민(T), 구아닌(G), 시토신(C) 염기들의 함량, 즉 염기조성에 대한 화학적 분석으로 [A]=[T], [G]=[C]라는 사실을 밝혀냈다. 여기서 []는 몰농도를 나타내며, 양변을 각각 더하면 [A+G]=[T+C] 즉 [퓨린계]=[피리민딘계]가 된다. 여기서 우리는 아데닌(A)과 티민(T), 구아닌(G)과 시토신(C)은 서로 상보적으로 결합하고 있음을 유추할 수 있다. 이것이 바로 ‘샤가프(Chargaff)의 법칙’이다. 이러한 염기들의 상보적인 결합의 발견은 향후 ‘왓슨-크릭 모형’의 발견에 일조하게 된다.
샤가프는 또한 [A+T]/[G+C]의 비율이 각각의 종마다는 다르게 나타나지만, 같은 종 내에서는 일정한 비율이 유지가 된다는 것도 밝혀냈다.
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