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◈임상화학실습 실험보고서◈ SubjectALT.AST 측정 - Reit...

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◈임상화학실습 실험보고서◈ SubjectALT.AST 측정 - Reitman Frankel법PricipleAST Aspartic acid와 α-ketoglutaric acid인 기질액에 효소 AST가 작용하면 Amino기가 전이되며 Oxalacetic acid와 Glutamic acid가 생성된다. 생성된Oxalacetic acid에 2,4-dinitrophenyl hydrazine를 가하면 hydrazone이 되고 여기에 Sod. hydroxide 가하면 적갈색으로 발색되는데 이것을 비색한다. ALT Alanin과 α-ketoglutaric acid인 기질액에 효소 ALT가 작용하면 Amino기가 전이되어 Pyruvicacid와 Glutamic acid가 생성된다. 생성된Pyruvic acid에 2,4-dinitrophenyl hydrazine를 가하면 hydrazone이 되고 여기에 Sod. hydroxide 가하면 적갈색으로 발색되는데 이것을 비색한다.Purpose혈청중의 AST와 ALT를 측정하여 그것의 성질을 알아본다.Materials & Apparatustube, 흡광도계, 증류수, 혈청, micro pipet, AST기질액, ALT기질액, DNPH용액, Sod. hydroxide , 표준액 Procedure1)2개의 시험관을 준비하여 AST, ALT를 표시한다.„)각 기질액 1ml씩을 취하고 37℃항온조에서 5분간 가온한다.…)각 시험관에 혈청0.2ml씩 가한다.†)37℃항온조에서 AST는 정확히 60분간, ALT는 정확히 30분간 방치한다.‡)시간이 되면, 각 시험관에 정색시약 1.0ml씩 가한다음 실온에서 20분간 방치한다.ˆ)0.4N NaOH용액을 10ml씩 가하여 혼합한 후 10분간 방치한다.‰)60분이내에 505nm에서 증류수를 대조하여 흡광도를 측정한다.Š)표준곡선 작성법 Result ...

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