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▣ 단백질의 분쇄 및 원심분리(1) Homogenizer 시료의 충분한 ...

본문일부 및 목차

▣ 단백질의 분쇄 및 원심분리(1) Homogenizer 시료의 충분한 혼합, 교반, 분쇄에 사용되는데 시료속에서 dispersing shaft가 회 전할 때 dispersing shaft의 끝부분의 rotor구멍으로 시료가 강하게 빨려 들어가 stator사이에서 혼합되어 높은 압력으로 수평 또는 수직으로 분산되어 혼합된다. 시료의 입자크기, 점도에 따라 rotor와 stator를 선택하여 사용하며 회전속도는 5,000∼45,000rpm 이므로 적절한 회전속도를 이용한다. (2) Centrifuge·원리 물질에 고도의 원심력을 걸어줄 경우 각 물질의 질량 또는 밀도에 따라 원심력 내에서 이동 속도가 다름을 이용하여 물질을 분리한다. ·종류 회전속도에 따라 다음과 같이 나뉜다. Low speed centrifuge (최대회전속도 10,000rpm 미만) High speed centrifuge (최대회전속도 10,000∼30,000rpm) Ultracentrifuge (최대회전속도 30,000∼120,000rpm)Method1. 단백질 분리에 사용할 시료의 선정 및 준비- B-3조 메주콩(100g)2. 0.1M Tris-HCl(pH7.2) 제조3. Homogenization4. 원심분리(9,000rpm 20min)5. 상등액 회수 260ml의 상등액을 얻을 수 있었다. 6. 냉동보관▣ Salting Out(1) 염석 (Salting Out) 염석은 물에 잘 용해하는 염(황산암모늄 등)을 단백질 혼합액에 가하여 이온 강 도를 증가시켜 단백질을 침전시키는 것이다. Method1. Ammonium Sulfate를 분말화 한다.2. Ammonium Sulfate첨가 포화 도표로부터 얻은 118g Ammonium Sulfate를 전...

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