등록인msr1997
등록/수정일21.03.01 / 21.03.01
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생물학 및 실험 과목에서 A+ 받았던 레포트입니다.
사용한 실험 방법에 대한 이론적인 배경 설명,
실험결과에 대한 해석,
예상결과에 다른 결과가 나온 이유에 대한 고찰,
수정방안 등을 위주로 작성하였습니다.
유용하게 사용하시길 바랍니다.
Ⅰ. 실험목적
항생제의 작용원리를 이해하고 항생제 감수성여부를 결정해 본다.
Ⅱ. 실험방법
1. 6mm의 원형 흡수지(disk)를 알루미늄호일에 올려놓은 뒤 항생제명(약명)을 표기한다.
2. 디스크에 표의 양을 들어가도록 계산하여 원형 흡수지에 떨어뜨린 뒤 자연 건조시킨다.
-디스크당 5㎕의 Volume이 들어가며, 항생제의 양은 아래 표와 같다.
Antimicrobial agent
Tube 표기
Conc.
Quantity/5㎕
Ampicillin
Penicillin G
Erythromycin
Amp
Pen
Ery
2㎎/㎖
1.2㎎/㎖
3㎎/㎖
10㎍
6㎍(10U)
15㎍
-예) 항생제의 농도가 10㎎/㎖이고, 10㎍의 disk를 만들 경우.
5㎕속에 10㎍의 항생제가 들어가게 하기 위해서는 항생제의 동도를 10㎍ ÷ 5㎍ = 2㎍/㎍가 되어야 하므로, 2㎎/㎖의 농도로 만들면 된다. 즉 10㎎/㎖의 항생제를 20㎕와 증류수 80㎕를 섞으면 2㎎/㎖(200㎍/100㎕)의 농도가 된다. 여기서 파이펫으로 5㎕를 취하여 disk에 떨어뜨린다.
3. 고압 멸균한 Nutrient agar를 45℃정도 까지 식힌 후 Petridish에 15ml(디쉬 높이의 1/3정도)넣은 후 10분정도 배지를 굳힌다.(준비됨)
4. Petridish에 균명을 기입한다.
5. 3개의 petridish 위에 해당균주를 각각 200㎕씩 spreader로 골고루 도말한 다음 cap을 닫아 놓는다.
6. 건조된 disk를 2cm이상의 간격으로 균이 도말된 배지위에 올려놓는다. (균주 마다 한 set로)
7. 35℃~37℃로 setting된 배양기(Incubator)에 넣어 16~24시간 동안 배양하고 그 균이 자라지 않은 최대 직경을 재고 저항성 여부(S, I, R)를 판단한다.
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