보고서 설명

생물학 및 실험 과목에서 A+ 받았던 레포트입니다.

사용한 실험 방법에 대한 이론적인 배경 설명,
실험결과에 대한 해석,
예상결과에 다른 결과가 나온 이유에 대한 고찰,
수정방안 등을 위주로 작성하였습니다.

유용하게 사용하시길 바랍니다.

본문일부 및 목차

Ⅰ. 실험방법

HIT Non-Heat Shock Transformation Protocol (1~10 minutes, efficiency = 10⁷~10⁹/㎍)
1. 10㎕의 IPTG가 들어있는 E. tube에 X-gal 40㎕를 넣고 잘 섞은 후 LB plate(contained 100㎍/㎕ Ampicillin)에 넣고 도말봉으로 골고루 도말한다.
2. -70℃에 100㎕씩 보관된 competent cell(E. coli, DH5a) tube를 꺼내어 손바닥에 쥐고 있 으면 cell용액이 녹기 시작한다. 2/3정도 녹으면 곧바로 아이스박스에 넣어둔다.
Note: competent cell에 점도가 큰 glycerol이 들어있어 cell이 녹았는지 파악이 잘 안 되 므로 살짝 흔들어 확인.
4. Plasmid DNA를 2µl를 넣은 후 1초간 Vortexing한다.
5. 1~10분간 아이스박스에 넣어둔다.
6. 배양기에서 LB plate를 꺼내어 그 위에 떨어뜨린 후 도말봉으로 골고루 도말한다.
7. 37℃ 배양기에서 plate를 뒤집어 넣은 후 밤새 배양한다.
8. 16~18시간 후 형성된 white/blue colony를 세고 관찰한다.

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