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등록/수정일15.02.15 / 15.02.15
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1. 목적
크로마토그래피에 의한 지시약의 분리 및 직접 합성한 아스피린의 전개를 통하여 크로마토그래피의
원리를 배운다
2. 원리
(1) 분리 방법의 종류
침전, 여과, 확산, 원심 분리, 증류, 추출, 전기영동 등
➀ 혼합물의 각 성분을 분리하는 방법
➁ 정량이 가능
➂ 광물의 금속, 이온, 동식물의 생체 시료, 미량의 환경 시료 분석 등에 이용
➃ 분배 평형의 원리
- 용매A와 용매B를 혼합한 용액에 녹아있는 분자 M에 대하여 용매A와 용매B 사이에 분포한
M을 [M(A)⇆M(B)] 와 같이 나타낸다.
- 분배계수 K는 두 용매 A,B 사이에서의 용질의 농도비이다.
- 혼합용질이 이동상(액체 또는 기체)에 섞여 고정상(고체)을 통과할 때, 각각의 용질은 서로 다
른 분배계수 K를 가진다.
➄ 분배계수가 다른 이유
- 용질 분자와 고정상을 이루는 물질 사이에 상호작용하는 힘이 다름
- 각각의 용질이 이동상에 대해 서로 다른 용해도를 가짐
(용해도가 큰 용질일수록 고정상에서의 이동속도가 빠르다)
(3) 이번 실험의 전개 방식
➀ TLC 실험 (Thin Layer Chromatography)
➁ 이동상으로는 극성이 다른 두 용매 CH2Cl2, CH3OH가 혼합된 용액을 사용함 (전개액)
➂ 지시약으로는 브로모 페놀 블루, 페놀프탈레인, 브로모 크레졸 퍼플, 페놀 레드 사용
➃ 아스피린을 n-hexane, ethyl acetate 혼합액으로 전개시킴
3. 기구 및 시약
➀ 기구 : TLC판, TLC전개병, 모세관, UV-lamp
➁ 시약 : 전개용매 (CH2Cl2:MeOH=5:1, Hx:EA=1:4), 시료 용액 (브로모 페놀블루, 페놀프탈레인,
브로모 크레졸퍼플, 페놀레드, 미지시료, 살리실산, 아스피린), 발색제(NH3)
4. 방법
① TLC판을 두 개씩 준비
② 첫 번째 TLC판의 바닥에서 1cm정도 떨어진 곳에 연필로 점을 5개 나란히 찍음
③ TLC판에 준비된 4가지 시료 용액 및 혼합 미지시료를 각각 모세관에 묻힌 후 TLC판에 차례로
찍고 완전히 말림
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